Б. Тишинский переулок,
д. 43/20 стр.2
+7 (499) 252-36-09

Биополимерный гетерогенный гидрогель Сферо®ГЕЛЬ — инъекционный биодеградируемый имплантат для заместительной и регенеративной медицины

В.И. Севастьянов1,2, Н.В. Перова1,2

1 Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов им. акад. В.И. Шумакова, 123182, г. Москва, ул. Щукинская, д. 1

2 Институт медико-биологических исследований и технологий, 123557, г. Москва, Б. Тишинский пер., д. 43/20, стр. 2

Севастьянов Виктор Иванович — доктор биологических наук, профессор, заведующий отделом биомедицинских технологий и тканевой инженерии ФНЦТИО, директор ИМБИИТ, тел. (499) 196-88-74, e-mail: viksev@yandex.ru

Перова Надежда Викторовна — доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории тканевой инженерии и систем доставки отдела биомедицинских технологий и тканевой инженерии ФНЦТИО, заместитель директора ИМБИИТ, тел. (499) 252-36-09, e-mail: 89266076625@mail.ru


Представлен краткий обзор экспериментально-клинических исследований композиции гетерогенного имплантируемо- го геля — Сферо®ГЕЛЬ, получаемый из тканей животного происхождения по защищенной патентом технологии ультра- диспергирования с последующей радиационной сшивкой. Доклиническими исследованиями доказана биологическая безо- пасность и функциональная эффективность биоимплантата. Клинические исследования были проведены в ряде крупных медицинских центров Москвы. Приведены примеры экспериментально-клинического применения Сферо®ГЕЛЬ в различных областях заместительной и регенеративной медицины.

Ключевые слова: биорезорбируемый микрогетерогенный гидрогель, биоискусственный внеклеточный матрикс, заме- стительная хирургия, регенеративная медицина, тканевая инженерия.

Bio-polymer heterogenic hydrogel sphero®gel — an injection biodegradable implant for substitutive and regenerative medicine

V.I. SEVASTYANOV1,2, N.V. PEROVA1,2


1Federal Scientific Center for Transplantology and Artificial Organs named after Acad. V.I. Shumakov, 1 Shchukinskaya St., Moscow, Russian Federation, 123182

2Institute for Medical-Biological Research and Technologies, 43/20 B. Tishinskiy per., building 2, Moscow, Russian Federation, 123557

Sevastyanov V.I. — Doctor of Biology, Professor, Head of the Department of Biomedical Technologies and Tissue Engineering of FSCTAO, Director of IMBRT, tel. (499) 196-88-74, e-mail: viksev@yandex.ru

Perova N.V. — Doctor of Biology, Leading Researcher of the Laboratory of Tissue Engineering and Delivery Systems of the Department of Biomedical Technologies and Tissue Engineering of FSCTAO, Deputy Director of IMBRT, tel. (499) 252-36-09, e-mail: 89266076625@mail.ru

The article presents a brief review of experimental-clinical research of the composition of heterogenic implantable gel — Sphero®GEL, obtained from animal tissues by the patented technology of ultradispersion with radiation cross-links. The pre-clinic research has proved the biological safety and functional efficiency of the bio-implant. The clinical research was carried out in a number of large medical centers in Moscow. Examples are given of the experimental-clinical application of Sphero®GEL in various branches of substitutive and regenerative medicine.



Key words: bio-resorbed microheterogenic hydrogel, bio-artificial territorial matrix, substitutive surgery, regenerative medicine, tissue engineering.

Введение

Наибольший интерес для заместительной и реге- неративной медицины представляют имплантаты из биологических полимерных материалов (биополи- меров), занимающих особую нишу на рынке биоре- зорбируемых (биодеградируемых) имплантируемых материалов и изделий [1, 2].

Биополимерные материалы или их композиции, содержащие биологически активные вещества, в наибольшей степени удовлетворяют основным тре- бованиям, предъявляемым к имплантируемым изде- лиям для заместительной и регенеративной меди- цины таким, как:

  • биосовместимость изделия и продуктов его де- струкции;
  • наличие биостимулирующих свойств;
  • возможность регулировать время биодеграда- ции;
  • способность к неоваскуляризации и неоиннер- вации;
  • выполнение функций каркаса и питательной среды для клеточных компонентов тканеинженер- ных конструкций;
  • хорошие адгезивные свойства к клеточным культурам;
  • стимулирование процессов пролиферации и дифференциации клеток;
  • возможность стерилизации без изменения меди- ко-технических свойств конечного продукта.

К биополимерным материалам, предназначенным для использования в заместительной и регенера- тивной медицине, относится композиция гетероген- ного имплантируемого геля Сферо®ГЕЛЬ [1-4].

Целью настоящей работы является краткий об- зор проведенных исследований, посвященных экс- периментально-клиническому применению нового имплантируемого биодеградируемого материала — Сферо®ГЕЛЬ, разработанного в АНО «Институт ме- дико-биологических исследований и технологий» совместно с ФГБУ «ФНЦ трансплантологии и искус- ственных органов им. акад. В.И. Шумакова» Минз- драва России, Москва.

Основные свойства микроструктурированно- го биополимерного имплантата Сферо®ГЕЛЬ

Композиция гетерогенного имплантируемого геля Сферо®ГЕЛЬ представляет собой микроструктури- рованный биополимерный гидрогель, выпускаемый под торговым знаком Сферо®ГЕЛЬ, ФСР 2012/13033 от 01.02.2012 г. Производитель ЗАО «БИОМИР сер- вис», г. Краснознаменск, Россия.

Сферо®ГЕЛЬ получают из гидролизата коллаген- содержащих тканей животного происхождения, с использованием технологии ультрадиспергиро- вания гидрогелей с последующей радиационной сшивкой [5]. По своей сути Сферо®ГЕЛЬ, содержа- щий практически все компоненты внеклеточного матрикса тканей животного происхождения, отно- сится к биоактивным биомиметическим гидрогелям [6]. Наличие микрогетерогенной структуры гидрогеля (рис. 1) позволило увеличить время его био- резорбции до нескольких месяцев по сравнению с биоимплантатами из коллагена, рассасывающихся в течение 3-4 недель и повышающих риск форми- рования рубцовой ткани.

Рис. 1

Микрофотография гетерогенной структуры

Сферо®ГЕЛЬ. Оптическая микроскопия, ув. Х40

По данным СЭМ (сканирующей электронной ми- кроскопии), Сферо®ГЕЛЬ обладает развитой струк- турой диффузионных пор от 200 до 400 мкм, что по- зволяет клеткам свободно прикрепляться к поверх- ности микрочастиц (рис. 2). Методом атомно-сило- вой микроскопии (АСМ) была обнаружена пористая структура микрочастиц с размером пор 2-4 мкм, что является позитивным свойством в процессах неова- скуляризации и неоинервации тканеинженерных конструкций на его основе.

Рис. 2

А — структура биоимплантата Сферо®ГЕЛЬ. Сканирующая электронная микроскопия;

Б — фибробластоподобные мезенхимальных стволовых клеток костного мозга крыс (Вистар) на поверхности Сферо®ГЕЛЬ. Время культивирования — 7 суток. Оптическая микроскопия, ув. х 400

Конечный продукт Сферо®ГЕЛЬ представляет со- бой находящийся в шприце стерильный прозрач- ный, слегка опалесцирующий, вязко-упругий гидро- гель, имеющий, в ряде случаев, видимую зернистую структуру (рис. 3). Содержание связанной воды в Сферо®ГЕЛЬ не менее 32,8±0,5 мас.%, набухае- мость — не ниже 86,6±3,0 мас.%, рН — 6,8-7,2.


Варьируя степень сшивки, размер микрочастиц биополимерного гидрогеля в диапазоне от 30 до 300 мкм и отношение твердой (микрочастицы) и жидкой фаз был создан линейный ряд импланта- тов, отличающихся временем биодеградации и рео- логическими свойствами. Преобладание упругих свойств над вязкостными свойствами позволяют Сферо®ГЕЛю оставаться в области его имплантации в мягкие ткани до полной резорбции, что было доказано, например, в экспериментах на крысах при имплантации в подкожно-жировую клетчатку (рис. 4).

Рис. 3

Общий вид инъекционной формы композиции гетерогенного геля Сферо®ГЕЛЬ

Биологическая безопасность Сферо®ГЕЛЬ была доказана в экспериментах in vitro и in vivo, проведенных в соответствии с национальным стандартом ГОСТ Р ISO 10993 в лаборатории, аккредитованной для доклинических испытаний медицинских изделий.


Рассмотрим несколько наиболее характерных при- меров экспериментально-клинического применения биополимерного микрогетерогенного коллагенсо- держащего гидрогеля Сферо®ГЕЛЬ [1-4, 7-21].

Сферо®ГЕЛЬ в технологиях заместительной хирургии

Применение микрогетерогенного биоимплантата Сферо®ГЕЛЬ при дегенеративно-дистрофических поражениях суставов


Самой распространенной формой поражения су- ставов, которая встречается у каждого третьего пациента в возрасте от 45 до 64 лет и у 60-70% больных старше 65 лет, является остеоартроз [22]. В основе заболевания лежит изнашивание, истон- чение и гибель суставного хряща с выпадением его амортизационной функции с последующим дегенеративно-дистрофическим изменением.

Рис. 4

Резорбция Сферо®ГЕЛЬ (красная окраска) при имплантации в подкожно-жировую клетчатку крысы.

А — гистологическая картина после имплантации в подкожно-жировую клетчатку на сроке 1 месяц. (Ув. Х 200) гематоксилин — эозин;

Б — гистологическая картина после имплантации в подкожно-жировую клетчатку на сроке 3 месяца. (Ув. Х 200) гематоксилин — эозин

При проведении проспективного двойного слепо- го плацебо-контролируемоего рандомизированного исследования было достоверно установлено по- ложительное действие внутрисуставного введения Сферо®ГЕЛя в течение не менее 3-х месяцев пациентам с гонартрозом: уменьшение боли и улуч- шение функциональной активности сустава при хорошей переносимости инъекции препарата [16]. Можно предположить, что благодаря биостимули- рующим свойствам биоимплантата Сферо®ГЕЛЬ, инициируются процессы собственной регенерации гиалинового суставного хряща.

Применение микрогетерогенного биоимпланта- та Сферо®ГЕЛЬ при поражениях периферической нервной системы

Главным препятствием на пути регенерирующих нервных волокон при хирургическом лечении по- вреждений периферической нервной системы явля- ется зона рубца между концами сшитого нерва. Для уменьшения вероятности формирования рубцовой ткани была предложена имплантация Сферо®ГЕЛя в зону хирургического вмешательства [10].

Экспериментальные исследования выполняли на самках нелинейных крыс, весом 200-250 гр. на седалищных нервах обеих задних конечностей. Все животные были разделены на две группы: 1 (контроль) — перерезка седалищного нерва с по- следующей его сшивкой без введения какого-ли- бо препарата; 2 — перерезка седалищного не- рва с введением в зону операции биоимплантата Сферо®ГЕЛЬ. В контрольной группе животных в области шва нерва образовывалась грубая соеди- нительная ткань, содержащая клеточные элементы (фибробласты, фиброциты, шванновские клетки) (рис. 5 А). Среди волокон соединительной ткани рубца отмечали регенерирующие аксоны. При вве- дении Сферо®ГЕЛя в область шва нерва наблюда- ли формирование более рыхлой рубцовой ткани и улучшение прорастания аксонов через область анатомического повреждения нерва (рис. 5 Б). Доказанный положительный эффект применения Сферо®ГЕЛя при реконструктивной хирургии пе- риферических нервов был подтвержден клиниче- скими исследованиями [11].

Рис 5

Рубцовая ткань в зоне перерыва седалищного нерва

А

Соединительнот- канные волокна рубца нерва с кле- точными прослойка- ми после перерезки. 21-е сутки послео- перационного периода:

  1. кровеносный сосуд;
  2. соединитель- нотканные волокна;

Рубцовая ткань в зоне перерыва седалищного нерва

Б

Сосуды соединитель- нотканного рубца седалищного нерва при применении имплантата «Сферо®Гель» в об- ласти перерезки.

21-е сутки после операции:

  • - кровеносные сосуды;
  • - эритроциты

Сферо®ГЕЛЬ в технологиях тканевой и реге- неративной медицины

Регенеративная (восстановительная) медицина — это обобщенный термин для обозначения различ- ных терапевтических и хирургических клеточных технологий, направленных на частичную или пол- ную компенсацию функций поврежденных или утраченных органов (тканей). В регенеративной медицине выделяют два основных направления [2]. Одно из них — регенеративная клеточная (или просто клеточная) терапия связана со стимулирова- нием клеточной/тканевой регенерации с помощью трансплантации стволовых клеток или их ассоциатов с соматическими клетками.


Второе направление заключается в восстанов- лении целостности и функций тканей и органов с помощью, так называемых, биоискусственных (тка- неинженерных) конструкций (ТИК), включающие в себя следующие компоненты:

  • клетки, способные формировать функционирую- щий внеклеточный матрикс;
  • подходящий биодеградируемый носитель (ма- трикс) для трансплантации клеток;
  • биоактивные молекулы (цитокины, факторы ро- ста), которые оказывают биостимулирующее дей- ствие на клетки поврежденной ткани.

Проведенные многочисленные исследования в ус- ловиях in vitro и in vivo доказали способность био- имплантата Сферо®ГЕЛЬ длительное время поддер- живать жизнедеятельность клеток, включая про- цессы дифференциации, пролиферации и синтеза собственного внеклеточного матрикса, который по- степенно замещает резорбирующийся биоимплан- тат [2-4, 7, 9, 12-14, 17-21]. Кратко остановимся на основных результатах, связанных с разработкой тканеинженерных конструкций хрящевой ткани, печени и поджелудочной железы, в которых ма- триксом является Сферо®ГЕЛЬ.


Тканеинженерная конструкция хрящевой ткани

В последнее время для получения эквивалента хрящевой ткани разрабатывают тканеинженерные конструкции с применением различных трехмер- ных полимерных матриксов [2, 23].

В проведенных нами экспериментальных иссле- дованиях в условиях in vivo и in vitro была показана перспективность данного подхода для формирова- ния тканеинженерной конструкции хрящевой ткани человека (ТИК ХТч) в условиях in situ при имплан- тации клеточно-инженерной конструкции хряще- вой ткани (КИК ХТ), состоящей из биополимерного микроструктурированого гидрогелевого матрикса (Сферо®ГЕЛЬ-лонг) и мезенхимальных стромаль- ных клеток жировой ткани человека (МСК ЖТч) [2, 19, 21].


Было доказано, что оптимальными условиями формирования ТИК ХТч in vitro являются хондро- генная дифференцировка МСК ЖТч в процессе культивирования непосредственно в Сферо®ГЕЛЬ- лонг при плотности посева 2×106 кл/мл матрикса. При культивировании КИК ХТ выбранного состава (Сферо®ГЕЛЬ, МСК ЖТч, хондрогенная среда) к 42 суткам хондрогенной дифференцировки наблюдали увеличение клеточной массы, прорастание клеток в толщу биоимплантата и увеличение количества вне- клеточного матрикса, вырабатываемого клетками. Клетки активно пролиферировали и вырабатывали компоненты собственного внеклеточного матрикса, в частности, гликозаминогликаны (ГАГ) и коллаген II типа, которые постепенно замещали резорбиру- ющий гидрогелевый матрикс (фиолетовая окраска), что может говорить о начале формирования in vitro тканеинженерной конструкции ХТ (рис. 6) [21].



Рис 6

Формирование ТИК хрящевой ткани из КИК ХТ, состоящей из БМГМ и МСК ЖТч, 42 сутки хондрогенной дифференцировки: 


А — окрашивание на коллаген по методу Маллори (указа- но стрелками), 

Б — иммуногистохимическое окрашивание антителами к коллагену человека II типа (показано стрелками), 

В — окрашивание альциановым синим на гликозаминоглика- ны (указано стрелками),

 Г — лакуноподобные структуры (изогенные группы клеток показаны стрелками), окрашивание гематоксилином и эозином. 

1 — МСК ЖТч, 2 — БМГМ. Ув. X 200 [21]

Эксперименты in vivo подтвердили возможность формирования ТИК хрящевой ткани в месте под- кожной имплантации клеточно-инженерной кон- струкции хрящевой ткани. Через 28 суток в пре- паратах опытной группы наблюдали более выра- женную, по сравнению с предыдущим сроком на- блюдения, резорбцию биополимерного гидрогеля с замещением его рубцовой тканью (рис. 7).

Выявлено прогрессивное увеличение массы кол- лагеновых волокон (рис. 7 Б) и локальное синезеленое окрашивание, характерное для ГАГ. В от- дельных участках имплантата встречаются немно- гочисленные лакунообразные структуры, характер- ные для хрящевой ткани (рис. 7 А). Можно предпо- ложить, что на более поздних сроках собственный внеклеточный матрикс ТИК ХТ постепенно заместит резорбирующийся временный биополимерный ма- трикс Сферо®ГЕЛЬ с образованием полностью био- логической хрящевой ткани.

Рис. 7

28 суток подкожной имплантации КИК ХТ, состоящей из БМГМ и МСК ЖТч: 

А — окрашива- ние гематоксилином и эозином (черными стрелками указаны лакунообразные структуры); 

Б — окрашивание на коллаген по методу Маллори (указано черными стрелками). 1 — гетерогенная клеточная популяция, 2 — БМГМ, капилляры указаны белыми стрелками. Ув. X 200 [21]

Тканеинженерная конструкция печени

В многочисленных работах для создания ТИК печени привлекают различной природы 2D- и 3D-матриксы, включая децеллюляризованную печень, и клеточные компоненты из разных источников [24].

Проведенная серия исследований по созданию инъекционной тканеинженерной конструкции печени показала перспективность использова- ния живого организма как биореактора для фор- мирования in situ тканеинженерной конструкции печени [12, 17, 18]. Образцы КИК печени, со- стоящие из Сферо®ГЕЛЬ и сокультивированных аллогенных клеток и печени и МСК костного моз- га крыс, имплантировали в паренхиму печени крысы через 7 суток после завершения модели- рования хронического токсического фиброзиру- ющего повреждения печени (затравка крыс CCl4

в течение 42 суток). На 7 сутки после окончания затравки наблюдали четко выраженные призна- ки фиброза (появление ложных долек печени). В контрольной группе крыс, которым вводили физиологический раствор, к 90 суткам после окончания затравки наблюдали дальнейшее раз- растание соединительной ткани и формирования внутридолькового фиброза с циррозом печени к 180 суткам.

Напротив, в экспериментальной группе животных через 90 суток в клеточных структурах импланти- рованных клеточно-инженерных конструкций отме- чался высокий уровень гликоген-аккумулирующей активности гепатоцитов, а сами конструкции ока- зываются функционирующими и полностью инте- грированными печеночной тканью реципиента. Че- рез 180 суток имплантации клеточно-инженерные конструкции были полностью интегрированы пече- ночной тканью реципиента с образованием новых функционирующих кровеносных сосудов и желч- ных протоков (рис. 8).

Проведенные биохимические и гистологические исследования показали, что имплантация пред- ложенной КИК в паренхиму печени способствует дефиброзированию ткани поврежденной печени и нормализации показателей функции печени по сравнению с контролем.

Рис. 8

Гистологическая картина после имплантации клеточно-инженерной конструкции (КИК) печени на 180 сутки (экспериментальная мо- дель хронического токсического фиброзиру- ющего повреждения печени крысы). Окраска гематоксилином и эозином. Ув. X 400. Инте- грация пересаженных аллогенных клеток пе- ченочной тканью реципиента с исчезновени- ем признаков фиброза [19]

Тканеинженерная конструкция поджелудочной железы

В отличие от биоинженерных конструкций хряще- вой ткани и печени работы по созданию ТИК не- многочисленны [25]. В качестве матриксов исполь- зуются, главным образом, гидрогелевые коллаген- содержащие матриксы.

В качестве первого шага создания тканеинженерной конструкции поджелудочной железы явилось исследо- вание влияния Сферо®ГЕЛя на культуры островковых клеток (ОК) [20]. При совместной в течение 2-х не- дель инкубации культур ОК со Сферо®ГЕЛем было от- мечено прикрепление ОК к поверхности биоматрикса. Часть прикрепившихся к биоматриксу ОК содержали значительную часть клеток, демонстрировавших по- зитивную реакцию при окрашивании антителами к цитокератину 19 — специальному маркеру протоко- вого эпителия. Одновременно в процессе совместной инкубации культур и БМГМ вокруг части прикрепив- шихся культур ОК формировались эпителиподобные однослойные зоны роста, являющимися прогенитор- ными клетками поджелудочной железы, то есть пред- шественниками ОК (рис. 9).

Из представленных результатов следует, что Сферо®ГЕЛЬ способствует длительному сохранению морфо-функциональных свойств флотирующих куль- тур ОК и росту прогениторных клеток поджелудочной железы в условиях in vitro и может быть использован в качестве инъекционного носителя при создании тка- неинженерной конструкции поджелудочной железы.

Рис. 9

Формирование однослойной культуры вокруг очага прикрепления флотирующей куль- туры островковых клеток поджелудочной же- лезы новорожденных кроликов к биоматриксу Сферо®ГЕЛЬ-лонг. Ув. X 400 [22]

Заключение

Таким образом, доклиническими и клиническими исследованиями были доказаны высокие биосовме- стимые и биостимулирующие свойства биополимер- ного микрогетерогенного гидрогеля Сферо®ГЕЛЬ.


Приоритетными областями применения Сферо®ГЕЛя в настоящее время являются:

  • хирургическое лечение остеоартроза;
  • профилактика формирования грубых послеопе- рационных рубцовых тканей при хирургическом ле- чении травм периферических;
  • тканевая инженерия и регенеративная медицина.

    Исследования выполнены при частичной финансовой поддержке РФФИ в рамках гранта №13-04-12017офи_ми РНФ в рамках гранта №14-25-00055.

ЛИТЕРАТУРА

Шумаков В.И., Севастьянов В.И. Биополимерные матриксы для искусственных органов и тканей // Здравоохранение и меди- цинская техника. — 2003. — № 4. — С. 30-32.

Севастьянов В.И., Перова Н.В., Немец Е.А., Сургученко В.А., Пономарева А.С. Примеры экспериментально-клинического при- менения биосовместимых материалов в регенеративной медици- не. В книге: Биосовместимые материалы (учебное пособие). Под ред. В.И. Севастьянова и М.П. Кирпичникова. — М.: МИА, 2011. — С. 237-252.

Перова Н.В., Порунова Ю.В., Урьяш В.Ф., Фаминская Л.А., Крашенинников М.Е., Расулов М.Ф., Онищенко Н.А., Севастьянов В.И., Шумаков В.И. Биодеградируемый коллагенсодержащий матрикс СферогельТМ для клеточной трансплантации // Перспективные материалы. — 2004. — № 2. — С. 52-59.

Севастьянов В.И. Биоматериалы, системы доставки лекар- ственных веществ и биоинженерия // Вестник трансплантологии и искусственных органов. — 2009. — Т. XI, № 3. — С. 69-80.

Севастьянов В.И., Перова Н.В. Инъекционный гетерогенный биополимерный гидрогель для заместительной и регенеративной хирургии и способ его получения. Патент РФ № 2433828 (2011).

Fisher S.A., Tam R.Y., Shoichet M.S. Tissue mimetics: engineered hydrogel matrices provide biomimetic environments for cell growth // Tissue Engineering. — 2014. — Part A. — 20 (5, 6). — P. 895-898.

Sevastianov V.I. Research and development of bioartificial organs and tissues by using biopolymer materials // J. Guangdong Non- Ferrous Metals. — 2005. — Vol. 15, № 2-3. — P. 53-59.

Sevastianov V.I., Lubyako A.A., Perova N.V., Grishin S.M. etc. First trial usage of the biodegradable matrix Sphero®GEL in the re- constructive surgery. Материалы IX Российско-Китайского симпозиу- ма «Новые материалы и технологии». В журнале: «Перспективные материалы (специальный выпуск)». — 2007. — Т. 1. — С. 147-152.

Sevastianov V.I., Vasilets V.N., Agapov I.I. Biopolymer implants for high-technology assistance in the field of replacement and regenerative medicine // Rare metals. — 2009. — Vol. 28. — P. 84-86.

Федяков А.Г., Древаль О.Н., Кузнецов А.В., Севастьянов Ф.И., Перова Н.В., Чапандзе Г.Н., Немец Е.А., Сатанова Ф.С. Экспе- риментальное обоснование применения гелевого имплантата «Сферо®Гель» и пленочного имплантата «ЭластоПОБ®» при травме периферической нервной системы в эксперименте // Вест- ник трансплантологии и искусственных органов. — 2009. — Т. XI, № 4. — С. 75-80.

Федяков А.Г., Древаль О.Н., Севастьянов В.И., Перова Н.В., Кузнецов А.В., Чапандзе Г.Н. Экспериментально-клиническое обо- снование применения биодеградируемых имплантатов в хирурги- ческом лечении поражений периферических нервов // Вопросы нейрохирургии им. Н.Н. Бурденко. — 2010. — № 3. — С. 15-18.

Shagidulin M., Onishchenko N., Krasheninnikov M., Iljinsky I., Mogeiko N., Lundup A., Shemerko N., Andriyanova A., Nemetc E., Sevastjanov V., Gautier S. Transplantation liver cells and multipotent mesenchymal stromal cells for correction and treatment of hepatic failure. Proceeding of 45thCongress of the European Society for Surgical Research — ESSR, Geneva, Switzerland, 9-12 June, 2010. — 2010. — P. 83-86.

Литвак Г.Ю., Баринов А.В., Комаров В.В., Тюнина Г.К., Перо- ва Н.В., Севастьянов В.И., Лубяко А.А., Шумаков В.И. Трансплан- тация первичной культуры островковой ткани ксеногенной под- желудочной железы больным сахарным диабетом // Технологии живых систем. — 2010. — Т. 7, № 1. — С. 19-27.

Сургученко В.А., Пономарева А.С., Кирсанова Л.А, Бубен- цова Г.Н., Скалецкий Н.Н., Севастьянов В.И. Формирование тка- неинженерной конструкции хрящевой ткани в условиях in vitro // Вестник трансплантологии и искусственных органов. — 2013. — 15 (3). — С. 66-72.

Севастьянов В.И., Перова Н.В., Сайковский Р.С., Соловьева И.В. Применение инъекционных форм биополимерных гетерогенных гидрогелей при дегенеративно-дистрофических поражениях су- ставов. Практическое пособие для врачей. — Москва: Триада, 2012. — 27 с.

Сайковский Р.С., Савенкова Н.А., Аверьянов А.В., Лисица А.В. Эффективность применения препарата Сферогель для лечения го- нартроза // Клиническая практика. — 2013. — 3. — С. 4-10.

Готье С.В., Шагидулин М.Ю., Онищенко Н.А., Крашенинни- ков М.Е., Ильинский И.М., Можейко Н.П., Люндуп А.В., Волкова Е.Н., Петраков К.В., Аврамов П.В., Перова Н.В., Севастьянов В.И. Кор- рекция хронической печеночной недостаточности при трансплан- тации клеток печени в виде суспензии и клеточно-инженерных конструкций (экспериментальное исследование) // Вестник РАМН. — 2013. — № 4. — С. 44-51.

Шагидулин М.Ю., Горкун А.А., Онищенко Н.А., Крашенинни- ков М.Е., Ильинский И.М., Можейко Н.П., Башкина Л.В., Сабурина И.Н., Севастьянов В.И., Готье С.В. Использование МСК различной онто- генетической зрелости для коррекции хронического фиброзирую- щего повреждения печени // Вестник трансплантологии и искус- ственных органов. — 2013. — Т. XV, № 3. — С. 73-82.

Surguchenko V.A., Ponomareva A.S., Kirsanova L.A., Bubent- sova G.N., Skaletskij N.N., Sevastianov V.I. On the Possibility of in Vitro Formation of Tissue-engineered Construct of Cartilage on the Basis of Cell-engineered Construct Composed of Biopolymer Hydrogel Matrix and Human Adipose Tissue-derived Mesenchymal Stromal Cells, In The Book: «Advanced Metals, Ceramics and Composites», (ed. H. Tu, K. Solntsev, R. Zhou), Yunnan Publ. Group Corp., Kunming, China, 2013. — P. 242-245.

Кирсанова Л.А., Баранова Н.В., Бубенцова Г.Н., Скалецкая Г.Н., Перова Н.В., Севастьянов В.И., Скалецкий Н.Н. Влияние микро- структурированного коллагенсодержащего гидрогеля на культуры островковых клеток поджелудочной железы // Вестник трансплан- тологии и искусственных органов. — 2014. — № 1. — С. 29-33.

Surguchenko V.A., Ponomareva A.S., Kirsanova L.A., Skaleckij N.N., Sevastianov V.I. The cell-engineered construct of cartilage on the basis of biopolymer hydrogel matrix and human adipose tissue- derived mesenchymal stromal cells (in vitro study) // J. Biomed. Mater. Research. — 2014. — 102 (3). Article first published online: 22 APR 2014 / DOI: 10.1002/jbm.a.35197.

Ревматология. Национальное руководство; Под ред. Насо- нова Е.Л., Насоновой В.А. — М.: ГЭОТАР_Медиа, 2010. — 720 c.

Chung C., Burdick J.A. Engineering Cartilage Tissue // Adv. Drug Deliv. Rev. — 2008. —60 (2). — P. 243-262.

Godoy G., Hewitt N.J., Albrecht U. et al. Recent advances in 2D and 3D in vitro systems using primary hepatocytes, alternative hepatocyte sources and non-parenchymal liver cells and their use in investigating mechanisms of hepatotoxicity, cell signaling and ADME // Archives of Toxicology. — 2013. — 87. — P. 1315-1530.

Amer L.D., Mahoney M.J., Bryant S.J. Tissue Engineering Approaches to Cell Based Type 1 Diabetes Therapy // Tissue Engineering Part B, Reviews. — 2013. — 21 (1). — P. 1-38.


АО "БИОМИР сервис"
Б. Тишинский переулок,
д. 43/20 стр.2
+7 (499) 252-36-09